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NFAT-Luc/THP-1

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I. Background
      细胞内钙(Ca 2+)通过激活多种下游细胞介质来调节多种细胞功能。细胞内 Ca 2+水平 升高导致 Ca 2+ 和钙调蛋白依赖性磷酸酶钙调磷酸酶的激活。钙调磷酸酶可去磷酸化并激活 转录因子活化 T 细胞核因子 (NFAT) 家族,该家族在免疫功能、炎症反应、血管生成、 细胞增殖和分化中起关键作用。

      NFAT 家族由 NFAT1、NFAT2、NFAT3、NFAT4、NFAT5 五个成员组成,除 NFAT5 外, 该家族的所有其他成员都受细胞内 Ca 2+变化的调节。NFAT 蛋白具有一个保守的 N 末端结 构域,其中包含多个丝氨酸残基,这些残基在静息条件下被磷酸化。NFAT 蛋白的核转位 在 N 末端调节结构域磷酸化后受到抑制。当细胞受到刺激时,丝氨酸残基的去磷酸化是由 Ca 2+依赖性磷酸酶钙调磷酸酶介导的。去磷酸化暴露了核定位信号,并促进了核转位和 NFAT 调节基因的转录诱导。响应钙调磷酸酶 Ca 2+介导的激活,NFAT 蛋白可以自行诱导基 因表达,也可以与其他转录因子协同诱导基因表达。NFAT 蛋白与其他转录因子(如激活 蛋白 1(AP-1)结合并协同发挥作用,以诱导基因转录。由于与其他转录因子相互作用, NFAT 蛋白可以整合来自不同途径的信号并执行多种细胞功能。NFAT 蛋白在免疫细胞中的 重要功能之一是诱导炎性细胞因子表达。
 
II. Description
      NFAT-Luc THP-1 报告基因药靶模型很好的模拟了体内 NFAT 的信号转导过程,原理见下图所示。



Figure 1. 
NFAT Stimulation Assay 验证结果
 
III. Introduction
Host Cell: THP-1
Expressed gene: NFAT-Luciferase
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+100 μg/ml hygromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Peripheral blood
Disease: Acute monocytic leukemia
Morphology: Monocyte
Growth Properties: Suspension
 
Ⅴ. Representative Data



Figure 2. Induction of NFAT activity by Cell Stimulation Cocktail  in  NFAT-Luc THP-1(C1).


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