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hIL2/IL15 Dual Effector(hCD25/hCD122/hCD132) Reporter Cell

CBP74192

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I. Background

      白细胞介素-2 (IL-2)是一种 o 糖基化的四α -螺旋束细胞因子,主要由活化的 T 细胞、 树突状细胞和 B 细胞产生。作为一种细胞毒性 T 淋巴细胞(CTL)和 NK 细胞的强效诱导 剂,IL-2 是最早被获批用于治疗转移性黑色素瘤和肾细胞癌症的免疫治疗药物之一。但是, IL-2 免疫疗法由于其体内半衰期短和治疗剂量下的严重毒性,因此获批以后并未得到广泛 应用。IL-2R 由 IL2Rα /CD25、IL2Rβ /CD122 和 IL2Rγ /CD132 亚基组成。IL-2 与 CD25 的 结合诱导调节性 T 细胞(Tregs)的增殖,是由于 CD25 会优先在 Tregs 上表达,而 Treg 细 胞的耗竭已被证明可以增强 IL-2 诱导的抗肿瘤免疫,这表明 Treg 可能是 IL-2 介导的 CTL 扩增的主要障碍。

      IL-2 通过与各种类型的 IL-2 受体结合而发挥刺激和调节功能,包括单体、二聚体和三 聚体。某些 T 细胞,如 Tregs,表达由 CD25、CD122 和 CD132 亚基组成的高亲和力异源 三聚体受体。初始 CD8 T 细胞、CD4/CD8 记忆性 T 细胞和 NK 细胞表达亲和力较低的 CD122 和 CD132 的二聚体受体,该受体缺乏 CD25 亚基。二聚体受体与 IL2 的亲和力是完 整三聚体受体亲和力的百分之一。当 CD25 单独存在时,其亲和力最低,并且单独的 CD25 并不传导胞内信号,其中下游信号通路激活必需依赖 CD122/CD132 亚基,CD25 的主要作 用是促进 IL-2 结合。

      IL-2 首先被 CD25 捕获,引起 IL-2 的构象变化,增加其对 CD122 和 CD132 的亲和力, 使 CD122 和 CD132 胞质尾部信号基的二聚化,导致 Janus 激酶 JAK1 和 JAK3 的磷酸化, 进而对 CD122 亚基尾部的关键酪氨酸残基发挥激酶活性。下游信号通路主要有三条:JAK- STAT 通路、磷酸肌肽 3 激酶(PI3K)-AKT 通路和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路。

 
II. Background

      hIL2/IL15(hCD25 hCD122 hCD132)Effector Reporter Cell 报告基因药靶模型很好的模拟了体内 IL2 受体三亚基的信号转导过程,原理见下图所示。
 



Figure  1. 
hIL2/IL15(hCD25 hCD122 hCD132Effector Reporter Cell 细胞模型原理图

 
III. Introduction
Expressed gene: IL2R、IL15R
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+1ug/ml puromycin+800ug/ml hygromycin+10ug/ml blasticidin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Representative Data

Figure 2. Recombinant hIL2/IL15 Dual Effector(hCD25/hCD122/hCD132) Reporter Cell constitutively expressing IL2Rα.

Figure 3. Recombinant hIL2/IL15 Dual Effector(hCD25/hCD122/hCD132) Reporter Cell constitutively expressing IL2Rβ.

Figure 4. Recombinant hIL2/IL15 Dual Effector(hCD25/hCD122/hCD132) Reporter Cell constitutively expressing IL2Rγ.

Figure 5. Dose Response of Recombinant Human IL2/IL15 in hIL2/IL15 (hCD25 hCD122 hCD132) Effector Reporter Cell (C26).



Figure 6. Dose Response of Recombinant Human IL2 in hIL2/IL15 Effector Reporter Cell.

 

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